伊紅染色液
Eosin Staining Solution
●
產(chǎn)品組成：
|
組分貨號
|
名稱
|
規(guī)格
|
貯存
|
|
EO1016S
|
伊紅染色液
|
100
ml
|
RT 避光
|
|
|
說明書
|
一份
|
|
● 產(chǎn)品簡介：
伊紅(Eosin)是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中解離成帶負電荷的陰離子，可以和蛋白質(zhì)氨基上帶正電荷的陽離子結(jié)合，可以使細胞胞漿染成不同程度的紅色或粉紅色，而蘇木素染色液能將細胞核染成藍色，與紅色胞漿形成鮮明對比，從而使蘇木素伊紅(HE)染色成為病理組織切片中最廣泛使用的一種常規(guī)染色方法。
本染色液可以重復(fù)使用，直至認(rèn)為效果不佳時再換用新的染色液。一個包裝的本染色液至少可以染色200個樣品。
● 貯存：
RT避光保存，一年有效。
● 操作步驟：
1. 需要用戶自己準(zhǔn)備的試劑
a. 固定液： 4%多聚甲醛固定液。
b. 分化液(5%的乙酸溶液或0.5%的鹽酸乙醇)；
c. 如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，和封片劑及80%乙醇、90%乙醇、無水乙醇；
d. 70%乙醇。
2. 樣品處理
a. 對于石蠟切片：
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。
換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。
無水乙醇5分鐘。
90%乙醇2分鐘。
80%乙醇2分鐘。
70%乙醇2分鐘。
蒸餾水2分鐘。
b. 對于冰凍切片：
固定液固定10分鐘以上。
蒸餾水2分鐘。
c. 對于培養(yǎng)細胞：
固定液固定10分鐘以上。
蒸餾水洗滌2分鐘。
換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。
3. 伊紅染色
對于上述處理好的樣品：
伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。 此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水、透明和封片處理。
注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進行伊紅染色。
4. 脫水、透明、封片或進行其它染色
a. 脫水、透明、封片：
70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，無水乙醇10秒。二甲苯透明5分鐘。
換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。
用中性樹膠或其它封片劑封片。
顯微鏡下觀察，細胞漿呈粉紅色或紅色。
b. 進行其它染色：
如果進行免疫熒光染色，或進行Hoechst等熒光染料的染色，在伊紅染色液染色后： 70%乙醇洗滌2次，每次2分鐘。 PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。 然后就可以進行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。如果免疫熒光染色效果不佳，可能染料對抗體結(jié)合有影響，請單獨染色。